2025-06-22 04:08:38
RNA甲基化修飾(m6A)研究RNA甲基化修飾約占所有RNA修飾的60%以上,而N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是高等生物mRNA和lncRNAs上為普遍的修飾。目前發現microRNA,circRNA,rRNA,tRNA和snoRNA上都有發生m6A修飾。m6A修飾主要發生在RRACH序列中的腺嘌呤上,其功能由“編碼器(Writer)”、“消碼器(Eraser)”和“讀碼器(Reader)”決定[1]。“編碼器(Writer)”即甲基轉移酶,目前已知這個復合物的成分有METTL3,METTL14,WTAP和KIAA1429;而ALKBH5和FTO作為去甲基酶(消碼器)可逆轉甲基化;m6A由m6A結合蛋白識別,目前發現m6A結合蛋白(讀碼器)有YTH結構域蛋白(包括YTHDF1,YTHDF2,YTHDF3,YTHDC1和YTHDC2)和核不均一蛋白HNRNP家族(HNRNPA2B1和HNRNPC)。m6A酶系統METTL3是早先被鑒定為結合SAM的組件,其缺失引起小鼠胚胎干細胞、Hela細胞和HepG2細胞中m6Apeaks的減少。METTL3及其同源蛋白METTL14定位在富含剪切因子的細胞核內亞細胞器-核小斑(Nuclearspeckle)上,顯示m6A修飾可能和RNA的剪切加工相關。WTAP與METTL3–METTL14二聚體相互作用,并共定位于核小斑,影響甲基化效率,參與mRNA剪。而KIAA1429作為候選的甲基轉移酶復合體的新亞基。這項技術可用來將含有上千種不同蛋白質的樣品中,分離和濃縮出特定蛋白質。上海兔科研技術服務技術
中華文化促進會文化創新與傳播委員會會長朱建聲、西安海棠學院院長馮居秦、西安交通大學人文學院EDP中心主任、中華風采人物媒體社長王天保、西安市EMBA助企商會會長張西安、陜西省糖尿病協會副會長張麗、陜西省養生協會會長李靖、陜西省職業經理人協會名譽會長劉志超、西藏鷹山科技集團董事長張沛、西安天歌干細胞健康管理中心總經理楊海軍和團隊及各行各業企業界朋友、受益者近200人參與了活動。西安天歌干細胞健康管理有限公司總經理楊海軍介紹了成立一年來的工作情況和未來的發展布局。隨后,天歌干細胞健康管理中心負責人分別同中華文化促進會文化創新與傳播委員會會長朱建聲;西安市(EMBA助企商會)/西安市EMBA商會會長張西安;鄭州天歌干細胞健康管理有限公司總經理張永紅和上海豪景**器械有限公司總經理張建國進行了簽約儀式。主持人同中華風采人物媒體社長、新時代風采人物研究會會長、文化名人收藏大家王天保,中華風采人物媒體主編李西紅,西藏鷹山科技集團董事長張沛分別從幾個話題闡述和討論了大健康產業的未來前景。為了答謝各界朋友的的支持與厚愛,活動舉行了現場抽獎環節,將活動掀起了高潮。通過活動一方面讓大家和身邊的朋友更關注健康。上海裸鼠科研技術服務實驗可以發現與疾病發生相關的關鍵基因和蛋白質,從而為疾病的預防和檢查提供新的思路。
外泌體的功能外泌體可能作為細胞之間物質和信號通訊的途徑,不同的細胞通過分泌攜帶不同組分的外泌體實現細胞間通訊,這些外泌體被受體細胞吸收,通過物質交換或釋放內含物實現物質和信號的交流。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現:外泌體表面膜蛋白質被目的細胞表面的受體識別,從而靶細胞;外泌體在蛋白酶作用下產生的表面膜蛋白質碎片可作為目的細胞表面受體的配體;外泌體脂膜可以與目的細胞膜融合,將蛋白質和RNA等內容物釋放進去,此類膜融合可能改變靶細胞的一些膜特性,例如脂質和膜蛋白質的密度及種類;目的細胞通過胞吞的形式攝入外泌體經由以上幾種途徑,外泌體將其攜帶的生物信息運輸到周邊靶細胞或經血液等體液運輸而被遠處組織細胞攝取,進而影響目的細胞的基本功能和基因表達。幾乎所有的細胞都可以在自發或在一定刺激條件下產生外泌體,不同的細胞產生的外泌體具有不同的功能,這些外泌體參與了一系列生理和病理過程,如發生與發展、抗原呈遞、免疫調節、組織愈合等。此外,外泌體與疾病的研究表明:外泌體可能在代謝性疾病的出現以及心血管健康中發揮作用。
原理HE染色主要使用蘇木精和伊紅這兩種染液,其中蘇木精堿性染液為藍色,可以將組織的酸性結構染成藍紫色(細胞核呈現藍色;軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍;粘液呈灰藍);伊紅是一種化學合成的酸性染料,在水中解離成帶負電荷的陰離子,易于蛋白質氨基中的正電荷結合使細胞漿染色。細胞漿、肌肉、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色。材料與儀器小鼠、固定液、酒精、二甲苯、石蠟、蜂蠟蘇木精染液、伊紅酒精溶液、鹽酸酒精溶液甘油蛋白粘片劑、中性樹膠石蠟包埋機、切片機、恒溫箱、蠟杯酒精燈、解剖剪、培養皿、鑷子、單面刀片染色缸、蓋玻片、載玻片、玻片盤、顯微鏡溫度計、水浴鍋步驟一、制作卵巢石蠟切片1、取材小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)進行麻醉,頸椎脫臼法處死小鼠,取出雙側卵巢。取下所需組織,切成一小塊3~4mm厚。2、固定、洗滌、脫水(1)將切好的卵巢組織用生理鹽水洗一下,使用中性福爾馬林固定液固定30~50min。后用流水沖洗3次,每次5min。(2)卵巢組織依次經70%、80%、90%乙醇溶液脫水,各30min。(3)再放入95%、**乙醇溶液各2次,每次20min。3、透明、透蠟(1)使用純酒精、二甲苯等量混合液處理組織15min。科研技術服務致力于推動前沿科技的研究與發展,為企業提供定制化的技術解決方案。
代謝組學的研究對象大都是相對分子量在1000以內的小分子物質,因此常用的血液樣本在取樣后,應小心操作,防止溶血,盡快分離出血清,分置于溫環境下保存。由于用于理實驗的動物采集相對其他樣品的采集,操作更繁瑣,在處理過程中許多細節容易忽略,造成數據不完美(甚至不能用)。因此接下來將重點介紹樣品采集的注意事項及其固定。樣品采集注意事項應新鮮,操作時間盡可能短,否則細胞發生死后變化、自融及現象。是動物心臟還在跳動時采集,樣本取出后在5分鐘以內置于固定液內,避免長時間暴露在空氣環境中。塊盡量小而薄。塊的厚度以不超過5mm為宜,較為理想的厚度為2mm左右,主要目的是使固定液迅速而均勻的滲入塊內部。勿使塊受擠壓。在采集過程中,應盡量選擇較為鋒利的手術,如手術刀片等,避免操作過程中擠壓挫傷標本。擠壓過的均不可用。固定液的量一般以塊大小的20倍為宜,能夠在容器內自由移動。盡量保持的原有形態。新鮮經固定后,或多或少產生收縮現象(如胃腸),為此可將展平,以盡可能維持原形。保持清潔。塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用生理鹽水沖洗,然后再入固定液,但要注意防止損傷。要熟悉采集部位。要能準確的按解剖部位采集。幫助科研人員深入理解疾病的共同性,還為新藥研發、疫苗測試等提供了有效的平臺。上海疾病科研技術服務構建
protocol 分享|小鼠卵巢組織切片 HE 染色。上海兔科研技術服務技術
在人類疾病研究中數據表明,常用實驗動物模型按產生原因分為以下5類:自發性動物模型、誘發型動物模型、遺傳工程動物模型、生物醫學動物模型和陰性動物模型。下面上海研錄帶大家一起看看吧:1、自發性動物模型:是指動物未經任何有意識的人工處理,在自然條件下或基因突變條件下所產生的疾病模型。主要包括突變型的遺傳病模型和近郊系的疾病模型。2、誘發型動物模型:亦稱實驗性動物模型。是使用物理、化學或生物致病因素誘導動物產生某些類似人類疾病表現而制備的動物模型。此模型具有制備方法簡單,實驗條件容易控制,重復性好等特點,廣泛應用于藥物篩選、毒理、傳染病、病理機制的研究。3、遺傳工程動物模型:是利用遺傳工程技術對動物基因組進行修飾,用于研究基因功能或疾病機制的動物模型。也稱基因修飾動物模型,是指利用胚胎工程和基因工程等生物技術有目的的干預動物的遺傳組成,導致動物出現新的性狀,并使其能夠有效地遺傳下去,形成新的可供生命科學研究的和其他目的所用的動物模型。4、生物醫學動物模型:也是指利用健康生物的特定生物學特征,研究人類疾病相似表現得模型。這類動物模型與人類疾病存在一定的差異,研究者應加以比較,從中獲得有關材料。上海兔科研技術服務技術